地龍中藥制品的成分

參環(huán)毛蚓和背暗異唇蚓含溶血成分：蚯蚓素(lumbritin)，解熱成分：蚯蚓解熱堿(lumbrofebin)，有毒成分：蚯蚓毒素(terrestro-lumbrilysin)等。還含6-羥基嘌呤( hypoxanthine)，黃嘌呤(xanthine)，腺嘌呤(adenine)，鳥嘌呤(guanine)，胍(guanidine)，膽堿(choline)，以及丙氨酸(alanine)，纈氨酸(valine)，亮氨酸(leucine)，苯丙氨酸(phenylalanine)，酪氨酸(tyrosine)，賴氨酸(lysine)等氨基酸。我國市面出售的赤子愛勝蚓和美國紅蚓即紅色愛勝蚓的雜交種，稱為“大平二號(hào)蚓”，其中含有天冬氨酸(aspartic acid)，蘇氨酸(threonine)，絲氨酸(serine)，谷氨酸(glutamic acid)，甘氨酸(glycine)，丙氨酸，纈氨酸，蛋氨酸(methionine)，異亮氨酸(isoleucine)，亮氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，賴氨酸，組氨酸(histidine)，精氨酸(arginine)，脯氨酸(proline)和鋅、銅、鐵、鉻、硒、鉬、佤、鎂等元素。近年從赤子愛性蚓體內(nèi)找出血小板活化因子(platelet activating factor)，其前體物質(zhì)1-O-烷基-2-?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(1-O-alkyl-2-acyl-sn-glycerophosphocholine)占磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine)的比例高達(dá)61.4%。

據(jù)日本人研究含有溶血作用物質(zhì)蚯蚓素(Lumbitin,C259H528O125N47SP3(CaCl2)19·3H2O，解熱作用物質(zhì)蚯蚓解熱堿(Lumbrofebrin,C9H18N2O6)可能為酪氨酸(Tyrosine)的衍生物，并有一種有毒成分蚯蚓毒素(Terrestro-lumbrilysin)。此外，并含有脂肪酸、類脂化合物、膽固醇、膽堿、維生素B、黃尿圜(Xanthine)、胍(Guanidine)及磷等。

地龍藥理作用

1.溶栓和抗凝作用

參環(huán)毛蚓體腔液干粗粉直接注入大鼠十二指腸30mg/kg，以動(dòng)靜脈插管串線粘附纖維蛋白方法測纖維蛋白生成，具有明顯的溶纖維蛋白活性，煮沸或烘干后活性即喪失。以纖維蛋白平板測定法證明，凍干粗粉5μg與尿激酶1u的溶纖維蛋白活性相當(dāng)。但纖維蛋白平板經(jīng)85℃水浴加熱30min后，尿激酶的活性喪失而凍干粗粉的活性仍部分保留。說明凍干粗粉溶纖維蛋白機(jī)制與尿激酶不完全一樣。尿激酶的作用是激活纖維蛋白溶酶原使之成為有活性的纖溶液，催化纖維蛋白溶解，蚯蚓凍干粗粉除了有尿激酶樣纖溶作用外，尚有直接催化纖維蛋白水解的作用。赤子愛勝蚓提取液在體外對兔靜脈血栓有溶解作用，對已凝固的纖維蛋白膠板也有一定纖溶活性。其纖溶作用有直接纖維蛋白溶解和激活纖溶酶原的間接作用，但以直接纖溶為主。家兔靜注蚯蚓水浸液0.lg/kg或0.2g/kg，對頸總動(dòng)脈一頸外靜脈血流套路法實(shí)驗(yàn)性血栓形成有明顯抑制作用，灌服1g/kg亦有明顯抑制，但軟弱，靜注0.02g/kg有溶栓作用。家兔靜注廣地龍(Lumbricus kangtang6nsis)醇提取注射液(每 1ml含生藥 2g)2ml/kg，可明顯延長血小板血栓和纖維蛋白血栓形成時(shí)間，使血栓長度和干重減少，并降低血液粘度。家兔靜注人工養(yǎng)殖的正蚓科雙胸蚓屬(Lumbricche bimastos)粗提取液，可顯著降低血中纖

維蛋白原含量，并使代球蛋白溶解時(shí)間顯著縮短。粗提取液

經(jīng)進(jìn)一步萃取，制備出含多種纖溶酶和纖溶酶原激活物的制劑，具有良好的溶解血栓作用，可使兔血漿組織型纖溶酶原激活物(t-PA)活力增加，血小板聚集性顯著降低，全血粘度和血漿粘度降低，紅細(xì)胞剛性指數(shù)降低，提示其通過促進(jìn)纖溶、抑制血小板聚集、增強(qiáng)紅細(xì)胞膜穩(wěn)定性等發(fā)揮作用。蚯蚓干粉水浸液在體外對家兔纖維蛋白和凝血塊均有溶解作用。家兔靜注水煎醇沉注射液對耳緣靜脈血栓有明顯溶解作用。正常志愿者口服蚯蚓提取物亦有明顯的抗凝和纖溶作用，且與劑量相關(guān)。凝血活酶時(shí)間明顯延長，纖溶酶原激活物活性增強(qiáng)，代球蛋白溶解時(shí)間縮短及纖維蛋白降解產(chǎn)物含量增加。從蚯蚓提取的纖溶酶(凍干粉)給家兔灌胃，0.05g/(kg·d)或 0.1g/(kg·d)，連續(xù)3d，從心臟取血，在體外形成的血栓長度、濕重、干重均較對照組明顯減少。

地龍煎劑在體外對牛凝血酶促進(jìn)人血纖維蛋白原凝聚有明顯抗凝血酶作用。赤子愛勝蚓提取物對凝血酶時(shí)間(TT)有明顯延長作用，在缺乏抗凝血酶-III(AT-III)的血漿中加入該提取物也可使TT明顯延長，但延長程度較小，說明這種作用有依賴AT-III和不依賴AT-III的兩個(gè)部分。家兔靜注地龍?zhí)崛∥?EE)可明顯延長TT其半衰期0.32h在體外EE亦可明顯延長TT和白陶土活化部分凝血活酶時(shí)間(KPTT)。廣地龍水浸液加堿水解后再用乙醇分級(jí)分離，所獲提取物亦可明顯延長KPTT和TT，其抗凝血酶活性不能被AT-III抗體及魚精蛋白中和，表明其活性不依賴于AT-III 該活性成分不屬多糖或蛋白質(zhì)，可能是一種耐堿耐熱的小肽或含雙鍵化合，與水蛙素、肝素等抗凝物質(zhì)不同。 高血粘度綜合征和缺血性中風(fēng)患者每口口服赤子愛勝蚓提

取液，連續(xù)14d為三療程，服1～2療程，患者的血細(xì)胞比、血沉、血漿粘度、血纖維蛋白原等均有降低。家兔靜注地龍?zhí)崛∫海墒寡“寰奂燥@著降低，全血粘度和血漿粘度降低，紅細(xì)胞剛性指數(shù)降低。

2.對心血管系統(tǒng)的作用

(1)抗心律失常作用給動(dòng)物

靜注地龍注射液對氯仿一腎上腺素或?yàn)躅^堿誘發(fā)的大鼠心律失常，氯化鋇或毒毛花著G誘發(fā)的家兔心律失常均有明顯的對抗作用;對心臟傳導(dǎo)亦有抑制作用。

(2)降血壓作用麻醉犬靜注廣地龍熱水浸劑或乙醇浸出

液0.1g/kg，30～45min出現(xiàn)血壓下降，可維持2一3h;正常大鼠三次灌胃大劑量(10g/kg)或腎型高血壓大鼠每日準(zhǔn)胃小劑量(50mg/kg)，連續(xù)2星期，均有明顯的降壓作用。腎型高血壓大鼠血壓下降出現(xiàn)于給藥后3～7d并于停藥后第2星期回升到用藥前水平。廣地龍的降壓機(jī)制可能是由于它直接作用于脊髓以上的中樞神經(jīng)系統(tǒng)或通過某些內(nèi)感受器反射地影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起部分內(nèi)臟血管的擴(kuò)張而使血壓下降。大鼠靜往廣地龍煎劑0.25g/kg，立即引起血壓下降，其降壓過程與血小板活化因子(PAF)相似，如預(yù)先靜注PAF受體阻滯劑CV6209顯著抑制廣地龍的降壓作用，提示類PAF物質(zhì)是廣地龍的重要降壓成分。對易卒中自發(fā)性高血壓大鼠(SHRSP)喂食含地龍飼料，可在不影響SHPSP體重的情況下降低SHRSP血壓，改善血管彈性即增加主動(dòng)脈負(fù)荷濕重比(拉力g/主動(dòng)脈濕重mg)

和斷裂時(shí)主動(dòng)脈最大負(fù)荷(拉力g/主動(dòng)脈濕重mg)，降低心體重比(心肌mg/體重g ×10-3)，增加腎體重比，且還具有利鈉、利尿和降低三酸甘油作用，提示地龍可能有一定的預(yù)防SHRSP卒中發(fā)生的作用。

3.對神經(jīng)系統(tǒng)的作用

①治療缺血性腦卒中(中風(fēng))：預(yù)先腹腔注射地龍注射液10g/kg，對蒙古沙土鼠一測預(yù)總動(dòng)脈結(jié)扎造成的缺血性腦卒中具有一定的預(yù)防作用，可減輕缺血性腦卒中的癥狀，如立毛、轉(zhuǎn)圈行為和打滾發(fā)作等的發(fā)生率下降，并明顯降低動(dòng)物的死亡率，使缺血性腦卒中動(dòng)物腦組織中降低了的單胺類遞質(zhì)5一羥色胺和多巴胺趨于恢復(fù)，而對去甲腎上腺素含量則無明顯影響。②抗驚厥和鎮(zhèn)靜作用：小鼠腹腔注射地龍醋酸鉛處理的提取液，可明顯對抗戊四氮和咖啡因引起的驚厥，但不能對抗土的寧引起的驚厥，提示其抗驚厥作用部位是在脊髓以上的中樞神經(jīng)部位。小鼠腹腔注射地龍乙醇浸出液20g/kg，對電驚厥也有對抗作用，ED為22.18g/kg。地龍醇浸液對小鼠、家兔有鎮(zhèn)靜作用。③解熱作用：蚯蚓水浸劑對大腸桿菌內(nèi)毒素及溫?zé)岽碳ひ鸬陌l(fā)熱家兔均有良好的解熱作用，但較氨基比林的作用弱?？诜V地龍散 12g，對健康人體溫?zé)o降低作用，對感染性發(fā)熱患者降溫作用優(yōu)于阿司匹林(口服0.3g)對非感染性發(fā)熱亦有效，但作用出現(xiàn)較晚，一般于服約后0.5-3h顯效，2-5h體溫降至正常。

4.抗癌作用

小鼠每日灌服地龍?zhí)崛∥飈1mg/只，連續(xù)58d，對移植的肉瘤S180。有明顯的抑制作用，不僅瘤體明顯減少，且可延長小鼠的生存期。小鼠每日灌服地龍?zhí)崛∥?/P>

1mg/只，連續(xù)6d，對移植性實(shí)體瘤H22。也有明顯抑制作用。班蚓提取物經(jīng)透析后的透析外液對接種肉瘤S180或?qū)嶓w瘤EMT6。的小鼠均有抑制腫瘤生長的作用，該成分經(jīng)100℃加熱20min，抑癌作用即消失。地龍可透析組分在體外對胃癌細(xì)胞MGC803的胸腺嘧啶脫氧核背( H3-TdR)的滲入有明顯抑制作用，該組分經(jīng)56℃加熱0.5h抑瘤作用仍然存在，表明該有效組分分子較小而且耐熱。應(yīng)用凝膠過濾技術(shù)對地龍?zhí)崛∥镞M(jìn)行分離獲 4個(gè)組分。組分I在體外對胃癌細(xì)胞 MGC803的3H-TdR滲入有非常顯著的抑制作用，該組分經(jīng)56℃加熱0.5h抑瘤作用仍存在，但較未加熱組明顯減弱，提示該組分加熱后抑瘤作用部分保留，具有一定耐熱性。組分IV在體外對胃癌細(xì)胞MGC803的3H-TdR滲入也有非常顯著的抑制作用，但該組分經(jīng)56℃加溫0.5h后抑瘤作用即消失，提示該組分不耐熱，組分II和組分III則均無抑瘤作用。地龍?zhí)崛∥镌隗w外對培養(yǎng)的喉癌細(xì)胞 Hep-2有濃度依賴性抑制作用。小鼠灌服地龍?zhí)崛∥锱c5一氟尿呼慣(5-FU)聯(lián)合應(yīng)用對乳腺癌MA的治療有明顯協(xié)同作用，腫瘤生長比單用5-FU延遲3d，癌細(xì)胞變性壞死較

單用嚴(yán)重，小鼠存活時(shí)間也較單用延長陽門。地龍?zhí)崛∥锱c白介素2(IL-2)聯(lián)合應(yīng)用對小鼠肉瘤S180。亦可抑制腫瘤生長，表現(xiàn)協(xié)同作用。移植肉瘤S180。的小鼠灌服地龍?zhí)崛∥铮c5-FU聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，對腫瘤的抑制有協(xié)同作用，如與輻射增效劑AK123聯(lián)合應(yīng)用則產(chǎn)生更強(qiáng)的輻射增效作用，三者合用則抑瘤效果最好。在體外，地龍?zhí)崛∥锱cAK123合用對人喉癌細(xì)胞Hep-2也表現(xiàn)協(xié)同作用。地龍?zhí)崛∥锱c熱療聯(lián)合應(yīng)用對小鼠實(shí)體瘤 EMT6的抑制也有明顯協(xié)同作用。

灌服地龍?zhí)崛∥飳φ＜昂闪?S180)小鼠均有促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化作用，對給予直線電子加速器照射和未照射小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化也有促進(jìn)作用;但體外實(shí)驗(yàn)則對小鼠脾淋巴細(xì)胞和人血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化均有抑制作用。提示地龍?zhí)崛∥锟赡芡ㄟ^提高機(jī)體免疫能力而抑制腫瘤細(xì)胞生長的。小鼠腹腔注射地龍?zhí)崛∥?00mg/kg，連續(xù)6d，可使胸腺及脾臟有核細(xì)胞數(shù)明顯增加，脾細(xì)胞對刀豆球蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)的反應(yīng)性均明顯高于對照組，脾臟自然殺傷細(xì)胞(NK)及抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)

細(xì)胞毒(ADCC)活性也顯著高于對照組。對荷瘤小鼠的免疫功能亦有相似作用，但脾臟NK及AfXIC活性則顯著低于對照組。荷瘤小鼠經(jīng)深部X線治療機(jī)局部照射后，脾重、脾有核細(xì)胞數(shù)、NK細(xì)胞活性、ADCC活性及牌細(xì)胞IL-2活性均受到一定抑制，但如加用地龍?zhí)崛∫褐委?，則未見任何免疫抑制作用，甚至有所提高，提示對機(jī)體免疫功能都有一定的促進(jìn)作用。小鼠每日灌服地龍?zhí)崛∥?，可使尾血中吞噬?xì)胞化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)，提示可增強(qiáng)吞噬功能;荷瘤(S180)小鼠NK細(xì)胞活性下降，如灌服地龍?zhí)崛∥?d，則NK活性基本恢復(fù)。腫瘤患者服用地龍?zhí)崛∥?個(gè)月，采用系列抗入淋巴細(xì)胞及其亞群單克隆抗體(McAb)，用間接免疫熒光法檢測T3，T4，T8，T4/T8，Tb，Tac，B細(xì)胞亞群的值，服地龍?zhí)崛∥镎呖商岣逿3，T4及T4/T8及，提示其為一種免疫增強(qiáng)劑。接受放射治療的食管癌患者眼地龍?zhí)崛∥?50mg，每日2次，能控制患者白細(xì)胞下降，效果優(yōu)于免疫增強(qiáng)刑多抗甲素(polyactin A)。荷瘤(S180)小鼠每日灌服地龍?zhí)?/P>

取物100mg/kg，連續(xù)7d，能使因荷瘤而增加熒光產(chǎn)物(直接反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化速率)含量降低，血中谷優(yōu)甘肽還原酶(GR)、過氧化氫酶(CAT)、谷優(yōu)甘肽過氧化物酶(GSH-Px)動(dòng)和超氧化物

歧化酶(SOD)的活性則增加，提示地龍?zhí)崛∥镉星宄杂苫⒖怪|(zhì)過氧化的作用。但體外試驗(yàn)卻證明，地龍?zhí)崛∥锱c激光、血葉淋衍生物對S180癌細(xì)胞具有協(xié)同殺傷作用，化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度也明顯增高，如將自由基清除劑CAT和SOD加入培養(yǎng)基內(nèi)，則使增強(qiáng)的發(fā)光強(qiáng)度明顯減小，提示地龍?zhí)崛∥锏膮f(xié)同作用至少部分是通過增加活性氧而實(shí)現(xiàn)的。

5.平喘作用

豚鼠腹腔注射地龍液(每1ml含鮮地龍約

0.75g/ml)2ml，對卵蛋白引起的過敏性哮喘潛伏期明顯延長，吸入組胺引起的哮喘潛伏期也明顯延長，但對吸入乙酸膽堿引起的哮喘則無影響。大鼠腹腔注射地龍液2ml，連續(xù)3d對卵蛋白引起的被動(dòng)皮膚過敏反應(yīng)有抑制作用。在體外，地龍液8×10-7g/ml濃度對豚鼠離體氣管由組胺引起的收縮有明顯抑制作用。從蚯蚓提出的含氮成分對大鼠、家兔肺灌注法有顯著擴(kuò)張支氣管作用，并能對抗組胺和毛果美香堿引起的支氣管收縮。靜注于豚鼠，50%動(dòng)物可耐受致死量組胺。認(rèn)為地龍的某種組分可阻滯組胺受體，對抗組胺使氣管痙攣及增加毛細(xì)血管通透性的作用，此為平喘的主要機(jī)制。

6.對平滑肌的作用

從廣地龍?zhí)崛〕龅牡S色結(jié)晶，能使已孕和未孕大鼠或豚鼠離體子宮緊張度明顯升高，濃度增加可使之呈痙攣收縮狀態(tài);靜注1mg/kg，可使家兔在位子宮緊張度升高，靜注 3～6mg/kg或灌服 10～20mgl/kg，可使慢性子宮瘺管家兔子宮收縮明顯增強(qiáng)。此外，該結(jié)晶0.5～ 1mg/kg靜注，對家免在位腸管亦有明顯興奮作用，對大鼠后肢血管灌流亦表現(xiàn)明顯興奮，但對在體豚鼠支氣管作用較弱。

7.其他作用

蚯蚓3%醋酸提取物、2.5%硫酸提取物。

84%乙醇及石油醚提取物在體外對人型結(jié)核桿菌有較強(qiáng)抑制作用，由3%醋酸提取的兩種物質(zhì)抑制人型結(jié)核桿菌的最稀釋位數(shù)分別為100信及70倍，2.5%硫酸提取物的最高稀釋倍數(shù)為100倍，此三種提取物均耐熱; 84%乙醇及五油醚提取物的最高稀釋倍數(shù)均為3200倍，但不耐熱。

地龍?zhí)崛∥镌隗w外對小鼠和人的精子均有快速殺滅作用，其中的蛻拍酸、透明質(zhì)酸能迅速使精子制動(dòng)、凝集，并使其結(jié)構(gòu)受到破壞。

地龍?zhí)崛∫和庥脤窒扌杂财げ∮行?，?jīng)生化分析提取物具有特異性降解膠原纖維的膠原酶，其療效很可能是局部變性膠原纖維降解所致。

體內(nèi)代謝過程

家兔靜注參杯毛蚓注射液，以凝血酶時(shí)間測定為藥效指標(biāo)，按藥效一對數(shù)劑量關(guān)系估算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，表明其抗凝血酶有效成分在體內(nèi)屬一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除，符合二室模型，t1/2a。為4.1limn，t1/2β為140min，量效曲線下面積(AUC)為169.1mg/(kg·h)，清除率(CL)為0.964h-1。提示抗凝血酶成

分由血液向外周組織分布速率很快，而清除較慢，可能是一種小分子物質(zhì)，在體內(nèi)分布廣泛。

毒性

廣地龍熱浸劑給小鼠靜注LD50。為3.85g/kg，腹腔注射LD50。為95-115gl/kg，給大鼠灌胃0.lgl/(kg·d)，連續(xù)45d未發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)。小鼠腹腔注射廣地龍注射液，LD50為40.7g/kg。從廣地龍 1000g提得淡黃色結(jié)晶 2g，給小鼠為注 LD50。為 38.7mg/kg。按動(dòng)物急性死亡率法估測參壞毛蚓毒性組分的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，其在體內(nèi)屬一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除，呈一室模型，t1/2。為31.2min，僅為抗凝血酶成分消除半衰期的22.3%，因毒性組分半衰期短，所以地龍多次連續(xù)給藥不易造成蓄積中毒。比較安全。