蟬蛻的化學(xué)成分
1.黑蚱,蟬蛻含大量甲殼質(zhì)及蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)械到。含氮7.86%,灰分14.57%。
2、蚱蟬,蟬蛻內(nèi)含甲殼質(zhì)(chitin),蝶啶類色素;異黃質(zhì)喋呤(isoxanthopterin),赤蝶呤(erythropterin),蛋白質(zhì),氨基酸,有機(jī)酸,酚類化合物。氨基酸的相對含量以丙氨酸(alanine),脯氨酸(proline)和天冬氨酸(asparticacid)等最高;絲氨酸(serine),蘇氨酸(threonine),谷氨酸(glutamicacid),β丙氨酸(β-alanine),酪氨酸(tyrosine) 和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid)次之;異亮氨酸(isoleucine)苯丙氨酸(phenylalanine),亮氨酸 (leucine)較低;纈氨酸(valine),鳥氨酸(ornithine),蛋氨酸(methionine)等量最低。并含可溶性鈣。3、華南蚱蟬,蟬蛻含高含量甲殼質(zhì)蛋白質(zhì),以及L-纈氨酸(L-valine),γ-氨基丁酸,酪氨酸(tyrocine),谷氨酸。含三磷酸腺苷酶。
對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用:
從黑炸(CryptotympanaaTCMLIBataFabricius)羽后的蟬蛻,磨成粗粉,用95%乙醇回流提取,得灰白色固體,得率約2.5%。配成0.4%的注射液(以下簡稱蟬蛻),相當(dāng)于生藥0.16g/ml。研究了動物中樞神經(jīng)的藥理作用。
1、對士的寧所致小鼠驚厥的影響:小鼠ip蟬蛻0.3ml/10g。15分鐘后ip士的寧1.3mg/kg。觀察給士的寧后l小時內(nèi)小鼠死亡數(shù);記錄從給士的寧至死亡的時間;對產(chǎn)生驚厥的小鼠,觀察從給士的寧至開始驚厥的時間,與對照組比較,結(jié)果見表1。蟬蛻能減少士的寧引起的驚厥死亡數(shù),并能延長驚厥動物的存活期,延長士的寧所致驚厥的潛伏期。蟬蛻及其不同部位煎劑對硝酸士的寧所致的驚厥亦有明顯的對抗作用。含生藥2.4g/ml蟬蛻頭足煎液、去頭足蟬蛻煎液及連頭足蟬蛻煎液的抗驚厥作用與生理鹽水對照組比較,經(jīng)X測定均為P<0.01,差異非常顯著。三種蟬蛻煎液分別組間比較,經(jīng)X測定均為 P>0.05,無顯著性差異。
2.對實(shí)驗(yàn)性破傷風(fēng)小鼠的治療作用:以15MLD/kg的破傷風(fēng)毒素注于小鼠后肢肌肉,48小時ip給藥,每日1次,每次劑量:
①組對照溶媒0.3ml/10g;
②組蟬蛻0.3ml/10g;
③組蟬蛻0.3ml/10g十苯巴妥鈉注射液0.1ml/10g;
④組苯巴比妥鈉注射液0.1ml/10g。觀察給藥后7d中小鼠死亡情況。各組都不能避免破傷風(fēng)毒素所致小鼠的死亡,但蟬蛻能延長發(fā)病小鼠的存活期;如與苯巴比妥鈉聯(lián)用,較單用能顯著延長發(fā)病小鼠的存活期。
3.對戊巴比妥睡眠時間的影響:小鼠ip蟬蛻0.3ml/10g,5分鐘后ip戊巴比妥鈉30ml/kg,以翻正反射消失作指標(biāo),觀察睡眠時間,與對照組比較,結(jié)果見表3。蟬蛻能延長戊巴比妥鈉的睡眠時間。
4. 對小鼠自發(fā)活動影響:用多用記錄儀記錄動物活動的變化,單只小鼠觀察,以5min內(nèi)的活動次數(shù)為指標(biāo)。挑選活動次數(shù)為20-100次/5分鐘的正常小鼠隨機(jī)分組,分別ip蟬蛻和對照溶媒,劑量為0.3ml/10g,記錄給藥后不同時間小鼠活動次數(shù),組間比較。蟬蛻能顯著減少正常小鼠的自發(fā)活動。
5. 對咖啡因所致小鼠活動增強(qiáng)的影響:按4所采用的方法和指標(biāo)測定,對合格小鼠隨機(jī)分組,分別ip蟬蛻和對照溶媒,劑量0.3ml/10g。15分鐘后sc給苯甲酸鈉咖啡因50mg/kg,記錄給咖啡因后不同時間的小鼠活動次數(shù),組間比較,結(jié)果見表5。蟬蛻能著對抗咖啡因的興奮作用。
6.其他作用:實(shí)驗(yàn)還表明,蟬蛻對戊四氮所致小鼠的驚厥無對抗作用。對高燒家兔亦無解熱作用。
對免疫抑制和抗過敏作用:
1.對免疫器官重量的影響:取ICR小鼠,隨機(jī)分為四組,實(shí)驗(yàn)組分別po蟬蛻液(水煎液1ml=1g生藥)
2.5、 5g/kg,空白對照組給同體積生理鹽水,每天一次,連續(xù)10天。陽性對照組于實(shí)驗(yàn)前5天開始ip環(huán)磷酰胺25mg/kg,每日1次,連續(xù)5天。在末次給藥后24小時,摘除小鼠眼球,放血,處死,稱胸腺、脾臟重量。結(jié)果蟬蛻液5g/kg組明顯減輕免疫器官胸腺和脾臟的重量。
2.對小鼠碳廓清作用的影響:取昆明遠(yuǎn)交系鼠,按實(shí)驗(yàn)1方法分組、給藥,連續(xù)用藥5天。末次給藥后24小時,每鼠尾iv印度墨汁0.05ml/10g體重,注射后2和10 分鐘分別從眼眶后靜脈叢取血20ul。溶于2m10.1%碳酸鈉溶液中,靜置24小時后,用721分光光度計(jì)在波長680nm外測光密度(OD),并稱取肝脾重量,計(jì)算廓清指數(shù)K=(1ogOD1一logOD2)/(t1一t2)及吞噬指數(shù)a=(體重/肝脾重)xK。結(jié)果見表7,蟬蛻液2.5、5kg組K 值均明顯小于空白組,5g/kg組a值也明顯小于空白組。
3.對腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響:參考文獻(xiàn)方法,取ICR小鼠,按實(shí)驗(yàn)1的方法分組,連續(xù)給藥8天。于給藥后d5,每鼠ip0.5%淀粉生理鹽水溶液0.5ml,以活化腹腔巨噬細(xì)胞,在末次給藥后24小時,將2%雞紅細(xì)胞懸液 2.5ml注入小鼠腹腔,隨即吸出所注入的雞紅細(xì)胞懸液及腹腔滲出液置小瓶中,按常規(guī)方法處理觀察計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。蟬蛻液2.5、5g/kg組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)均非常顯著地小于空白組。
4、對小鼠耳異種被動皮膚過敏反應(yīng)(PCA)的影響:按文獻(xiàn)方法,制備大鼠天花粉IgE抗血清。取昆明遠(yuǎn)交系小鼠,分四組,連續(xù)給藥6天。陽性組在抗原攻擊前30分鐘每鼠ip異丙腎上腺素10mg/kg。給藥4天,于小鼠兩耳廓各注射1:2的抗血清20ul,48小時后以0.25ml天花粉伊文思藍(lán)溶液尾靜脈攻擊,30分鐘后脫臼處死小鼠,剪下兩耳,按常規(guī)處理,用721分光光度計(jì)在波長 640nm處測定光密度。結(jié)果見表9,蟬蛻液5g/kg組對小鼠耳異種PCA有明顯抑制作用。5、對大鼠顱骨骨膜肥大細(xì)胞脫顆粒反應(yīng)的影響:按文獻(xiàn)方法,陽性組于抗原攻擊前5分鐘內(nèi)尾iv異丙腎上腺素50ug/kg。給藥4天,將1:40的抗血清0.1mlsc于大鼠顱頂皮下組織,24小時后尾iv1ml 天花粉伊文思藍(lán)溶液,30分鐘后處死大鼠,按常規(guī)制片觀察,計(jì)算肥大細(xì)胞脫顆粒百分率。結(jié)果蟬蛻液2.5、5g/kg組均非常顯著地降低大鼠顱骨骨膜肥大細(xì)胞脫顆粒的百分率。
6.對2,4一二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠耳遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響:按文獻(xiàn)方法稍加改良,連續(xù)用藥10天。實(shí)驗(yàn)時,每鼠用7%DNCB丙酮液20ul背部sc致敏,9天后于小鼠右耳涂以1%DNCB甘油溶液30ul攻擊,16小時后處死,按常規(guī)方法觀察,結(jié)果 5g/kg組對DNCB所致的遲發(fā)型超敏反應(yīng)有明顯的抑制作用。
對家兔心電、血壓和呼吸的影響:
蟬蛻粗粉用95%乙醇回流提取,得灰白色固體,收率約2.5%,配成含醇提物0.4%的注射液,相當(dāng)于生藥0.16g/ml,實(shí)驗(yàn)用1.5-2.5kg的家兔,麻醉,抗凝,測頸總動脈血壓;氣管插管,用馬利氏鼓描記呼吸;Ⅱ?qū)?lián)描記心電圖。用蠕動泵恒速灌注蟬蛻注射液或?qū)φ找海嗡?.7ml/分鐘,劑量83.5ml/kg,結(jié)果血壓、呼吸無明顯影響,但可使心率顯著減緩。
對家兔肝腎功能的影響:
靜脈滴注蟬蛻注射液7ml/kg,用10%葡萄糖注射液稀釋至50ml,每日一次,連續(xù)7天,于8天和l3天取耳靜脈血,測定GPT、尿素氨,肌酐,將其與正常值之差作比較。結(jié)果對GPT無明顯影響,可使尿素氨下降,肌酐升高,停藥后均逐步恢復(fù)正常。
對紅細(xì)胞的保護(hù)作用:
取羊血制成2%的紅細(xì)胞懸液。對照品桔梗煎液(桔梗文火煎煮,配成4%煎液),按表13排列順序先后加入各種試液,輕輕搖勻,觀察各管澄明度,蟬蛻注射液對紅細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。
蟬蛻不同部位的藥理作用比較:
蟬蛻分為整體、頭足、身三部分,洗凈后分別加水煎煮兩次:第一次1小時,第二次0.5小時。過濾,合并濾液,濃縮至每ml藥液相當(dāng)原生藥1g,加95%乙醇,使藥液含醇量達(dá)85%,放置過夜,過濾。濾液除盡乙醇,加新鮮蒸餾水稀釋至規(guī)定濃度,過濾后灌封于5ml安瓿中、滅菌30分鐘,制成100%、 200%兩種不同濃度的供試液。
1.蟬蛻各部分鎮(zhèn)痛試驗(yàn)比較:選取14-17g小鼠,隨機(jī)分四組。各組均作sc給藥,30分鐘后,ip0.7%醋酸溶液(0,1ml/10g),觀察20分鐘內(nèi)每只小鼠的扭體次數(shù)。結(jié)果各組均有明顯的鎮(zhèn)痛作用,其強(qiáng)度為蟬蛻整體>身>頭足。
2.蟬蛻各部分對小鼠催眠的影響:取15-22g小鼠,隨機(jī)分四組。蟬蛻各部分均以25-31g/kgip給藥。30分鐘后ip0.3%戊巴比妥鈉(40mg/kg),觀察30分鐘內(nèi)小鼠入睡只數(shù)。與對照組比較,各組均有明顯的鎮(zhèn)靜。
3.蟬蛻各部分對硝酸士的寧致驚的影響:選取體重23-28g小鼠,隨機(jī)分四組,ig給藥,2小時后ip硝酸士的寧(1.25mg/kg),觀察在1小時內(nèi)鼠驚厥死亡只數(shù)。結(jié)果表明,各部分能降低硝酸士的寧引起的小鼠驚厥死亡率,有一定的抗驚作用。
4. 蟬蛻各部分對毛細(xì)血管通透性的影響:選取17-23g體重小鼠,隨機(jī)分四組,蟬蛻各組均以25-50g/kg作sc給藥,對照組用生理鹽水。15分鐘后經(jīng)尾iv0.5%伊文氏蘭溶液(0.2ml/只),30分鐘后ip0.5%醋酸(0.3ml/只),再過30分鐘處死小鼠,按常規(guī)方法,結(jié)果蟬蛻整體有降低毛細(xì)血管通透性的作用。
對內(nèi)毒素致死作用的影響:
取家兔于左耳iv精制大腸桿菌內(nèi)毒素(20ug/kg)后,立即從各兔右耳iv給藥(20g/kg),對照用生理鹽水,觀察24小時死亡情況,結(jié)果未見明顯的對抗內(nèi)毒素致死作用。